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时(shi)间(jian):|作者(zhe):
IP 这(zhe)是(shi)一种(zhong)利(li)用(yong)抗体(ti)特(te)异性(xing)反应(ying)来(lai)富(fu)集(ji)纯(chun)化(hua)目的蛋白的方法(fa),可以(yi)用于(yu)定性和(he)定量(liang)分析(xi)目的(de)蛋白。
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研(yan)究(jiu)基(ji)础(chu)
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原理
①结合原理(li)
特异(yi)性结合(he)来进(jin)行(xing)检测(ce)“protein A/G”抗(kang)体(免(mian)疫(yi)球蛋白(bai))与目标物(wu)质(zhi)发生(sheng)特异性结合Fc方法是通(tong)过对(dui)现象进行开(kai)发(fa)而(er)产(chan)生的。
②分离(li)原理
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实验(yan)流(liu)程(cheng)
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实验实施(shi)
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定性结(jie)果
①蛋白质谱(pu)检测
②蛋白检(jian)测
③考马(ma)斯(si)亮(liang)蓝检测
④电(dian)镜(jing)晶体结构(gou)分(fen)析
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定(ding)量结果
①检测蛋白表(biao)达(da)量
②考马斯亮蓝(lan)检测
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拓(tuo)展(zhan)
①Co-IP
证(zheng)明(ming)这两(liang)种蛋白在(zai)细(xi)胞(bao)内(nei)发生相互(hu)作用,可(ke)以是直接相互作用,也(ye)可以是通过(guo)形(xing)成(cheng)复(fu)合物后(hou)的间接(jie)相(xiang)互作用。
②ChIP
NA相互作用的技术。简(jian)称(cheng)ChIP,它(ta)可以帮(bang)助我(wo)们了(le)解(jie)在细胞中(zhong)特定基因的调(diao)控(kong)过程。这项(xiang)技(ji)术通过将(jiang)目(mu)标(biao)蛋(dan)白与(yu)其(qi)结合的DNA片段(duan)提(ti)取(qu)出(chu)来,并通过PCR或测序(xu)等方(fang)法进行分析。通过ChIP技术,我们(men)能(neng)够(gou)确定哪(na)些蛋白质与特定DNA序列相互作(zuo)用,并(bing)进一步(bu)研究它们在基因(yin)表达和细胞功(gong)能中的作用相互结合的实验技术。
③RIP
又称为(wei),即(ji)RNA免疫共(gong)沉(chen)淀是一(yi)种用于研究蛋白质与其他分子(zi)相互作用的方法RNA经(jing)典(dian)的技术方法,通过互相结合来实(shi)现(xian)。