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2020
分子间互作的5大实验方(fang)法:①蛋(dan)白质-蛋(dan)白质 ②蛋(dan)白质-RNA ③蛋(dan)白质-DNA ④蛋(dan)白质-DNA/RNA ⑤RNA-DNA 一、蛋(dan)白质-蛋(dan)白质 1.免疫(yi)沉(chen)淀(IP) 2.免疫共(gong)沉淀(dian)(co-IP) 3.GST pull-down ……
IP 抗体(ti)特异(yi)性反(fan)应(ying)是一(yi)种用于富(fu)集(ji)纯化目的蛋白的方法(fa),可用(yong)于定(ding)性(xing)和(he)定量(liang)分析 1 IP 研(yan)究基(ji)础(chu) 2 IP原理 ①IP 结(jie)合原理(li) IP特(te)异性结合(he)来(lai)实现(xian)抗原检测的一种(zhong)方法“protein A/G”特异的结合到抗体(免(mian)疫球蛋白(bai)Fc开发(fa)出(chu)来的(de)方法来解(jie)决片段现象 ②IP 分(fen)离原理 3 IP 实验(yan)流(liu)程 4 IP 实验实施
Co-IP:该研究关注(zhu)的是蛋白质(zhi)在体内(nei)自然状(zhuang)态(tai)下的相互作用,无法明(ming)确(que)显示这(zhe)些相(xiang)互(hu)作用是(shi)直接(jie)还是间(jian)接的 IP:利用抗体通过(guo)特异性结合抗(kang)原和抗体,可以(yi)分离(li)或(huo)纯化(hua)靶标蛋白,并检测(ce)其表(biao)达水(shui)平(ping) 2、Co-IP简单介(jie)绍(shao) 3、Co-IP 原理 ProteinA/G ProteinA/G 可以专门结合到(dao)免疫球蛋白的 FC 这部(bu)分片段(duan)可改写(xie)为(wei):因此,它(ta)能(neng)够与抗体结合并捕获复(fu)合物(wu),而抗体则(ze)能与目标蛋白结合,并且目(mu)标(biao)蛋白能与与之(zhi)相互作(zuo)用的蛋白结合 X代(dai)表复合物。
酵母细(xi)胞感(gan)受态的制(zhi)备及(ji)质粒的转(zhuan)化(1) 抽提BD和AD的相关质粒(浓度(du)最好(hao)在(zai)100-200ng/μL); (2)提(ti)前准备好所需(xu)的平板(ban)和培养基(3)酵母感受态的制备: 1)将酵母菌(jun)株(AH109或者(zhe)是其(qi)他(ta)的菌株(zhu))在YPDA培(pei)养(yang)基平板上(shang)划线(xian),30℃倒置培养3天左右,直到克(ke)隆大(da)小(xiao)为2-3m……
ZSCI国家(jia)自然科学基金项(xiang)目查询系统(tong)可(ke)以进行(xing)项目的查(cha)询(xun)】 (V2.0正式版) 该系统从11,我(wo)们(men)的程序(xu)猿小哥对(dui)系(xi)统进(jin)行了优化,使(shi)其在上线以来更加(jia)流畅。此外,还(hai)新(xin)增了(le)国家自(zi)然(ran)科学(xue)基金项目查询功(gong)能V2.0正(zheng)式版已(yi)经(jing)正式免费(fei)上线 2.0更(geng)新内容(rong):(保持基础功能不(bu)变 ①增(zeng)加学科热度比例; ②完善各(ge)类统计分析(xi)和整(zheng)体性分析,使得(de)分析更加全(quan)面(mian)和细致(zhi) ③电脑端(duan)增加【国(guo)家自然科(ke)学基金委(wei)员(yuan)会(hui)项目综合查询系统】、【科学网(wang)的基金项目查询系统】、【ZSCI文献数据(ju)库(ku)】、【国自然撰写工(gong)具包(bao)】4个友情(qing)链(lian)接。 ④优化系统页面细节(jie); ⑤优化手机端的
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